در بخش حاضر علف كش هاي بنتازون (bentazone)، مولينات (molinate)، تيوبنكارب (thiobencarb) و تري فلورالين (trifluralin)، در مورد اثر جهش زايي و نوتركيبي زايي بررسي شده اند. اين بررسي به وسيلهي آزمون لكه هاي بال در دروزوفيل (آزمون جهش و نوتركيبي سوماتيك SMART) انجام شده است. دو نوع آميزش استاندارد (ST) و زيست فعالي زياد (HB) استفاده شده است. آميزش دوم با حساسيت زياد به پيش جهش زاها و پيش سرطان زاها، شناخته مي شود. لاروهاي سه روزه، ترانس هتروزيگوت براي ژن هاي موهاي چندتايي بال (mwh) و پهن شدگي-3 (flr3)، با شش غلظت متفاوت از هر نوع علف كش تغذيه شدند. تغذيه تا تبديل شدن لاروهاي باقيمانده، به شفيره ادامه يافت و تغييرات ژنتيكي القا شده در سلولهاي پيكري ديسك هاي فرضي بال منجر به شكل گيري كلون هاي جهش يافته روي تيغهي بال شد. جهش هاي نقطهاي، شكست كروموزوم و نوتركيبي ميتوزي، يك لكه ايجاد مي كنند؛ در حالي كه لكه هاي دوقلو فقط توسط نوتركيبي ميتوزي توليد ميشوند. بنتازون كه به عنوان جهش زا شناخته نمي شد، به تست هاي لكهي بال در آميزش هاي HB، جواب مثبت داد. مولينات هم در آميزش هاي استاندارد و هم در آميزش هاي HB جواب مثبت داد. تيوبنكارب فقط براي آميزش هاي استاندارد آن هم با بالاترين غلظت (10 ميلي مولار) جواب مثبت داد. نهايتاً تري فلورالين، كه در مورد جهش زايي مفصلاً مطالعه شده است، در مورد آزمون لكهي بال براي هر دو نوع آميزش، جواب مثبت داد.
1- مقدمه
مشخص شده است كه بسياري از مواد به خودي خود جهش زا نيستند، ولي بعد از وارد شدن به بعضي مسيرهاي متابوليك، به مشتقاتي تبديل مي شوند كه مي توانند با DNA واكنش دهند. فعالسازي پيش جهش زاها در ابتدا توسط كمپلكس آنزيمي سيتوكروم P-450 انجام مي شود. اين كمپلكس آنزيمي قابليت متابوليزه كردن مواد بسياري را دارد. بيشتر خصوصيات مسيرهاي متابوليسمي كه به اندازهي كافي مطالعه شده اند، شباهت اساسي در بين گونه هاي متفاوت دارد. با اين همه، تبديلات زيستي كه پيش جهش زاها را به جهش زاها تبديل مي كنند مي توانند در گونه هاي مختلف، متفاوت باشند.
تا كنون چندين استراتژي براي مطالعهي اثرات جهش زا، معلول فعال شدن پيش جهشزاها در سيستم هاي زيستي متفاوت مثل ميكروارگانيسم ها، گياهان، دروزوفيل و سلول هاي پستانداران، استفاده شده است. بدون ترديد شناخت مسيرهاي متابوليسمي براي بررسي اثر جهش زايي علف كش ها لازم است زيرا بعضي از آنها براي فعال شدن بايد در يك مسير متابوليسمي تبديل شوند.
آزمون جهش و نوتركيبي پيكري بال (SMART) در مگس سركه، براي پيكري سريع و ارزان آسيب هاي ناشي از سم هاي جهش زا طراحي شد. اهميت SMART در اين است كه اثرات را در زيوه و در حضور فرآيندها متابوليك بررسي مي كند. به علاوه بايد به ياد داشته باشيم كه سيستم هاي فعالسازي متابوليك در مگس سركه بسيار شبيه اين سيستم ها در پستانداران است. در دوران جنيني سلول هاي ديسكهاي فرضي به طور ميتوزي تقسيم مي شوند و بسياري از جهش هاي نقطهاي، حذف ها، نوتركيبي هاي ميتوزي و جدا نشدن ها، در بال مگس سركه قابل ديدن است. اگر در يكي از سلول هاي ديسك هاي فرضي جهشي ايجاد شود، اين سلول يك كلون از سلولهاي جهش يافته ايجاد مي كند كه فنوتيپ يك ماركر مشخص را نشان مي دهند. استفاده از سويه هاي با فعالسازي زيستي بالا (HB)، كه خصوصيت آنها فعال تر بودن سيتوكروم P-450 است، پيدا كردن پيش جهش زاهاي دسته هاي مختلف را تسهيل ميكند.
آزموني ساده است كه توسط Bruce Ames براي مشخص كردن اينكه آيا يك ماده اثر جهش زايي دارد يا نه، طراحي شده است.
يك سويهي Salmonella Typhimurium كه داراي جهشي است كه يك آنزيم مسير بيوسنتزي اسيد آمينهي هيستيدين از كار بيافتد، روي محيط كشت بدون هيستيدين كشت داده مي شود. در حالت عادي تعداد كمي سلول، به علت وقوع جهشهاي برگشت، روي محيط رشد مي كنند (شكل 1). براي اينكه ماده اي مورد آزمون قرار گيرد، ديسك كاغذي را به آن ماده آغشته مي كنند و در وسط محيط كشت بدون هيستيدين قرار مي دهند. اگر مادهي مورد نظر جهش زا باشد، در فاصله اي از ديسك حلقه اي از كلوني هاي واجد جهش برگشت تشكيل مي شود و اگر جهشزا نباشد، هيچ حلقهي قابل تمايزي تشكيل نمي شود. فاصلهي حلقهي كلوني ها به قدرت جهش زايي ماده ربط دارد، طوري كه هرچه قدرت جهش زايي بيشتر باشد، فاصلهي حلقه بيشتر خواهد بود. چون بعضي از مواد فقط بعد از ورود به بدن و قرار گرفتن تحت اثر آنزيم هاي سلول، خاصيت جهش زايي پيدا مي كنند، گاهي مادهي مورد آزمايش را قبل از قرار دادن روي ديسك با عصارهي كبد مخلوط مي كنند. References:
1) B.N.Ames, J. McCann and E. Yamasaki, Methods for detecting carcinogens and mutagens with Salmonella/ mammalian microsome mutagenicity test, mutation Res. 31, 347-364 (1975).
فروشگاه فایل کیا؛
منبع جامع انواع فایل...
چنانچه فایل مد نظرشما در بین فایل های بارگذاری شده در سایت موجود نبود،می توانید از طریق دایرکت پیج اینستاگرام@kiyafile.ir سفارش دهید.